Để đánh giá vai trò của AQP3, Simona đã thực hiện việc làm im lặng AQP3 với các oligonucleotide siRNA cụ thể bằng cách sử dụng Hệ thống truyền tải siRNA hạt nano N-ter (Hình 3A, B). Để đánh giá vai trò của AQP3 trong việc đóng vết thương bằng keo ong, Simona thực hiện xét nghiệm vết thương xước (Hình 3C, D) trong tế bào sừng. Simona không thể quan sát thấy bất kỳ sự thay đổi đáng kể nào trong tốc độ đóng vết thương, xác nhận vai trò quan trọng của AQP3 trong việc làm trung gian cho quá trình đóng vết thương do keo ong gây ra.

Hình 3. Sự liên tục di truyền của AQP3 loại bỏ quá trình đóng vết thương do keo ong gây ra.

(A). Sự biểu hiện của gen AQP3 trong tế bào HaCaT sau sự can thiệp của RNA (RNAi). Số lượng mRNA của AQP3 được tính bằng qRT-PCR và được biểu thị bằng biểu thức tương đối trung bình ± SD (n = 3, * p <0,001, t-test).

(B) Biểu hiện protein AQP3 trong tế bào HaCaT (CTRL) sau AQP3 RNAi (RNAi). Các khối đại diện của ba đã được hiển thị. Các làn được nạp 30 µg protein, sau đó được thăm dò bằng kháng thể đa dòng kháng AQP3 của thỏ và được quản lý như mô tả trong Vật liệu và Phương pháp. Các đốm màu tương tự đã được loại bỏ và kiểm tra lại bằng kháng thể kháng beta-2-microglobulin (B2M), như công việc trông nhà (* p <0,001, t-test).

(C) Các phép đo độ đóng vết thương trong các tế bào bị xáo trộn hoặc trong các tế bào tiếp xúc với RNAi đối với AQP3 (AQP3 RNAi), có hoặc không có 0,001% keo ong, được tính bằng hiệu số giữa chiều rộng vết thương ở 0 và 24 h. Các thanh hiển thị trung bình ± SD của hai thí nghiệm độc lập, mỗi thí nghiệm có n = 25. Giá trị trung bình của đối chứng được đặt thành 100 (*** p <0,001, Bonferroni post-test).

(D) Hình ảnh hiển vi của vết thương do trầy xước đơn lớp HaCaT. Tế bào lộn xộn hoặc tế bào tiếp xúc với RNAi để tìm AQP3 (AQP3 RNAi) được ủ với sự hiện diện của 0,001% keo ong và sau đó nhuộm bằng toluidine màu xanh lam và quan sát 24 giờ sau khi làm vết thương.

Hơn 300 chất đã được xác định là thành phần hóa học của keo ong. Tỷ lệ của các hợp chất này trong keo ong phụ thuộc vào hệ thực vật địa phương [16,17]. Mức độ của các hợp chất hóa học trong các loại chiết xuất keo ong khác nhau, chẳng hạn như ethanolic, aqueous-ethanolic và aqueous glycolic đã được so sánh [18]. Chế phẩm etanolic bao gồm một lượng lớn resveratrol, chrysin và axit caffeic so với những loại khác. Vì vậy, Simona quyết định kiểm tra tác dụng sinh học của chiết xuất etanolic của keo ong.

Trong số các thành phần chính của keo ong, Simona có các hợp chất phenolic (flavonoid, axit thơm và benzopyrene), di- và tri-terpen, tinh dầu, axit thơm và este, aldehyde, xeton và phenylpropanoids (tức là axit caffeic). Flavonoid và axit phenolic là những thành phần liên quan trực tiếp đến đặc tính kháng khuẩn, chống viêm và chữa lành vết thương, nhưng tiềm năng sinh học của keo ong là kết quả của sự tương tác hiệp đồng giữa các thành phần của nó [16], bởi vì các hợp chất cô lập không tạo ra tác dụng tương tự như chiết xuất toàn phần.

Keo ong vẫn chưa được thử nghiệm về cơ chế vết thương và Simona quyết định thực hiện một loạt thí nghiệm để có cái nhìn sâu sắc hơn về tác dụng của nó đối với mô hình chữa lành vết thương.

Phương pháp điều trị bằng keo ong cho thấy độc tính tế bào thấp trên các tế bào HaCaT, như đã được đề xuất trong các thí nghiệm trên động vật. Do đó, những nhận xét này cho thấy keo ong có thể được coi là một chất an toàn cho các ứng dụng bên ngoài không chỉ cho làn da khỏe mạnh, mà còn là một sản phẩm để băng vết thương và vết bỏng.

Dữ liệu về vết thương do trầy xước của Simona đã chứng minh rõ ràng rằng keo ong gây ra sự gia tăng rõ rệt khả năng phục hồi vết thương của tế bào sừng. Simona cũng so sánh hiệu ứng này với kích thích gây ra bởi PL [4], thường được áp dụng trong thực hành lâm sàng [24]. Dữ liệu của Simona cũng tiết lộ rằng keo ong có thể tạo ra sự đóng vết thương trên các tế bào HaCaT ở một mức độ khác nhau. Ở mức 0,01%, keo ong gây ra một hiệu ứng tương tự như tác động của PL và ở mức 0,001%, nó có thể kích thích sự đóng vết thương ở một mức độ lớn hơn so với mức độ thu được với PL.

Hơn nữa, thử nghiệm di chuyển tế bào cho thấy keo ong kích thích khả năng đóng vết thương của tế bào sừng. Đặc biệt, Simona quan sát thấy keo ong gây ra hiệu ứng hóa học mạnh mẽ so với keo ong có 20% PL.

Hơn nữa, để nhận ra các cơ chế cơ bản của quá trình khai thác do keo ong này gây ra, Simona sử dụng pin ức chế các con đường tín hiệu tế bào chính, được biết là có liên quan trực tiếp đến quá trình tái tạo mô. BAPTA-AM là chất ức chế hiệu quả nhất trong xét nghiệm đóng vết thương do trầy xước, xác nhận vai trò thiết yếu của canxi nội bào, như đã chỉ ra trước đây trên các tế bào này, trong khi việc sử dụng SB203580 và PD98059 cho thấy sự đóng góp nhỏ của p38 và ERK1 /2 con đường.

Keo ong là một chất chống oxy hóa, tuy nhiên, nó cũng có thể hoạt động như một chất chống oxy hóa và có thể gây ra stress oxy hóa trong một số trường hợp nhất định. Tsai và cộng sự đã chứng minh rằng các ion kim loại chuyển tiếp là cần thiết cho stress oxy hóa do keo ong gây ra và các loại oxy phản ứng như H2O2 được tạo ra trong nuôi cấy tế bào. Các hợp chất phenolic có trong keo ong như galangin, chrysin và pinocembrin là chất mang điện tử tạm thời của chuỗi phản ứng oxy hóa khử, trong đó các điện tử từ các ion đen được chuyển tiếp đến các phân tử oxy tạo ra superoxide, sau đó được tạo ra H2O2. Cần lưu ý rằng sản xuất H2O2 do keo ong tạo ra rất thấp và ở nồng độ này, H2O2 có thể thể hiện vai trò tích cực như là chất chuyển hóa oxy hóa khử chính trong hoạt động cảm nhận oxy hóa khử, tín hiệu và điều hòa oxy hóa khử. Trong ánh sáng này, chúng ta có thể xem xét hiệu quả cao hơn 0,001%, với sự kết hợp giữa tác dụng oxy hóa thấp và tác dụng chống oxy hóa trung bình. Trong nghiên cứu của Simona, Simona đã xác nhận sự tham gia của H2O2 như là chất trung gian chính của tác dụng đóng vết thương của keo ong trên các tế bào HaCaT, một dòng tế bào sừng bất tử tự nhiên của con người.

Quý vị có thể tham khảo Keo ong Hàn quốc của Doctorbees

Cách sử dụng Keo ong Hàn Quốc UNIQUE Propolis: 

• Bổ sung và phục hồi sức khoẻ, phòng ngừa bệnh tệt: 5-10 giọt/1-2 lần/ ngày, có thể uống kèm nước hoa quả, nước lọc 
• Điều trị đau răng, vết bỏng, vết thương hở: nhỏ trực tiếp tại chỗ, 5-10 giọt/ ngày 
• Đau dạ dày: 20 giọt/ 2-3 lần/ngày trước bữa ăn 

Độc quyền phân phối Keo ong Hàn Quốc tại Việt Nam: DOCTORBEES TIMES CITY 

TN-K1 TTTM TIMES CITY, 458 MINH KHAI, HAI BÀ TRƯNG, HÀ NỘI 

Hotline: 0911876668                   Website: doctorbees.vn